細(xì)胞冷凍液氮罐的具體操作步驟

　　如何在液氮罐中保存大量細(xì)胞?液氮罐通常充滿低溫液氮。細(xì)胞的儲(chǔ)存需要低溫。將其放入-196度的液氮中，是細(xì)胞長期保存的合適環(huán)境。細(xì)胞冷凍液氮罐是將細(xì)胞儲(chǔ)存在液氮罐的液相中。它有一個(gè)特殊的方形抽屜提籃。將2ml冷凍儲(chǔ)存管放入冷凍儲(chǔ)存箱中，然后倒入提籃中，浸入液氮中，浸入其中。只有使細(xì)胞處于液氮-196度的環(huán)境中，細(xì)胞才能長期保存。

　　細(xì)胞冷凍液氮罐的具體操作步驟：

　　1、培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞按常規(guī)方法消化，或分離獲得原代細(xì)胞后，在離心管中收集。

　　2、使用離心機(jī)離心，去除上清，收集細(xì)胞沉淀。

　　3、根據(jù)細(xì)胞生長密度，加入適量的LiveCyteTM細(xì)胞凍存液進(jìn)行重懸，充分混合。

　　4、將細(xì)胞懸液放入冷凍儲(chǔ)存管中，直接放入-80°C冰箱儲(chǔ)存。24小時(shí)后可移入液氮長期保存(可選)。

　　細(xì)胞冷凍液氮罐的細(xì)胞恢復(fù)過程：

　　1、從-80°從C冰箱或液氮罐中取出細(xì)胞。

　　2、快速放進(jìn)37°C水浴，不時(shí)搖晃，在3分鐘內(nèi)融化。金鳳液氮罐

　　3、在冷凍儲(chǔ)存管中加入少量培養(yǎng)液，然后將細(xì)胞混合液轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)液的離心管中。樣品與培養(yǎng)液的比例為1：10、然后輕輕吹打，攪拌均勻。

　　4、離心后清除上清，收集細(xì)胞沉淀。

　　5、輕輕彈性細(xì)胞沉淀，在培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中加入適量培養(yǎng)液，輕輕搖晃，使細(xì)胞分布均勻，在37℃孵化器中培養(yǎng)。